Реагенты для автоматизированного анализа крови

Важным расходным материалом любого гематологического анализатора являются реагенты. Они зачастую стоят достаточно дорого и постоянно требуются для выполнения анализа. Использование различных реагентов существенно влияет на себестоимость исследования и его качество. Для каждого анализатора крови разработаны специальные реагентные системы, которые имеют общие свойства.

Основными составляющими реагентов для гематологических анализаторов являются:

1. изотонический разбавитель;
2. лизирующий раствор;
3. промывающий раствор (для очистки системы);
4. очищающий раствор (для очистки и/или сервисных работ).

У разных моделей гематологических анализаторов может использоваться только часть перечисленных реагентов.

Изотонический разбавитель – это буферный раствор с фиксированным значением рН, электропроводностью и осмолярностью. Раствор называется «изотоническим», так как поддерживает требуемое осмотическое давление для обеспечения постоянства объема клеток крови. Эритроциты принимают тот объем, который продиктован осмолярностью раствора. Если осмолярность раствора будет увеличена, то эритроциты сжимаются до некоего равновесного объема за 3-5 секунд. При уменьшении осмолярности раствора, происходит увеличение объема эритроцитов. Таким образом, средний объем эритроцитов (MCV) увязывается с осмолярностью изотонического разбавителя. При использовании изотонического разбавителя, который не соответствует модели и марке гематологического анализатора, получаемые значения нельзя назвать достоверными. Происходит завышение или занижение среднего объема эритроцитов.

Использование стабилизирующих добавок в изотоническом разбавителе позволяет сохранить форменные элементы крови в первом разведении в течении цикла всего анализа анализа крови на автоматическом анализаторе. Для предотвращения образования фибриновых сгустков и агрегации тромбоцитов добавляется антикоагулянт.

Использование антибактериальных добавок в гематологических реагентах, непосредственно в изотонических разбавителях, препятствуют накоплению белковых соединений и заражению гидравлических магистралей гематологических анализаторов.

Еще один важнейший реагент для гематологических исследований - лизирующий раствор (гемолитик), сохраняет лейкоциты и вызывает лизис эритроцитов. Для точного подсчета количества лейкоцитов, которые во много раз меньше эритроцитов, необходимо чтобы гемолиз эритроцитов был полный и законченный. Поэтому лизирующий раствор, включает в себя сложную композицию ионных поверхностно-активных соединений.

В автоматических анализаторах с возможностью дифференциации лейкоцитов на 3 популяции при воздействии лизирующего раствора изменяются размеры лейкоцитов. Возможно выделить лимфоциты (которые расположены на первом пике) и гранулоциты (крайний правый пик). В средней части лейкоцитарной гистограммы, находятся моноциты, базофилы и эозинофилы. Параметры реагентной системы сильно влияют на качество дифференциации лейкоцитов

Для анализаторов, имеющих возможность дифференциации лейкоцитов на 3 популяции, оптимально работать с цельной кровью. Для таких анализаторов изотонический разбавитель содержит специальные добавки, которые модифицируют мембраны лейкоцитов, и его возможно использовать только в согласованной паре с лизирующим раствором.

Промывающие растворы косвенным образом участвуют в процессе измерения. Без качественной промывки магистралей гематологического анализатора крови невозможно добиться точных результатов. Для анализаторов, в которых применен принцип Культера, характерно наличие счетных апертур малого диаметра. Вещества в крови осаждаются на апертуре и на поверхностях гидравлической системы. Это приводит к уменьшению диаметра апертуры и ее засорении, как следствие, к ошибочным результатам. Поэтому выбор качественных промывочных растворов влияет на ресурс и стабильность работы автоматического анализатора.

Промывающие растворы бывают трех типов. Растворы для мягкой промывки – это первый тип.  Используются для промывки магистралей анализатора клинического анализа крови между взятием проб. Данный тип растворов не содержит активных детергентов в больших концентрациях. Растворы на основе гипохлорита натрия – второй тип растворов. Данные растворы применяются для очистки от белковых соединений. Т.к. данные растворы очень едкие, то долгий контакт раствора с деталями анализатора неблагоприятен, пластик становится ломки, метал начинает ржаветь. Данные растворы применяются для экстренной очистки и сервисных работах. Ферментативных промывающих растворов – третий тип растворов. Данный тип растворов благодаря содержанию ферментов хорошо удаляет остатки белковых соединений на стенках системы. При этом данный тип растворов нейтрален и не разрушает анализатор даже при длительном использовании.