Метод «сухой химии»: Исследование биологических жидкостей

При использовании тест-полосок необходимо учитывать, что стабильность и чувствительность аналитических систем будет напрямую зависеть от качества реагентов, входящих в их состав. Для обеспечения сохранности аналитических материалов тестовых зон полосок нужно соблюдать следующие

Правила работы с тест-полосками:

• Хранить пеналы в темном, сухом, прохладном помещении без присутствия паров летучих химических веществ.
• Тест-полоски держать в плотно закрытых заводских упаковках-пеналах.
• Не подвергать тест-полоски воздействию влаги, прямого солнечного света.
• Доставать только необходимое для исследования количество тест-полосок.
• Не дотрагиваться пальцами до реакционных зон.
• Проводить измерение при температуре 15-30 °С.
• Не использовать тест-полоски после истечения срока годности.

Взаимодействие исследуемого аналита с соответствующей ему тестовой зоной в матрице полоски приводит к изменению цвета индикатора, интенсивность которого будет варьироваться в зависимости от концентрации анализируемого вещества. Изменение цвета оценивается визуально (сравнивается с эталонной цветовой шкалой для каждого компонента) или при помощи специального автоматического устройства для полуколичественной оценки результата исследования.

Рис. 1 Тест-полоски с реагентом Multistix 10 SG

Варианты сравнения изменения цвета тест-полоски с окраской цветовой шкалы:

Интенсивность окраски аналитической зоны тест-полоски и цветовой шкалы близка или совпадает — концентрация исследуемого компонента в образце приближается или равна количественному или качественному значению, указанному на шкале;

Интенсивность окраски аналитической зоны тест-полоски и цветовой шкалы находится в интервале окраски двух соседних участков цветовой шкалы. В этом случае допустима следующая оценка результатов (в зависимости от рекомендаций производителя):

• Используют значение, соответствующее более интенсивно окрашенной зоне цветовой шкалы.
• Используют значение, соответствующее менее интенсивно окрашенной зоне цветовой шкалы.
• Результат интерполируют, рассчитывая среднее значение двух соседних участков цветовой шкалы.

Факторы влияния на визуальную оценку изменения цвета диагностических зон тест-полоски при сравнении их с эталонной шкалой:

• Недостаточность освещения в помещении.
• Изменение цвета диагностических зон, обусловленные интенсивной окраской мочи.
• Различная индивидуальная способность оператора к цветоощущению.
• Несоблюдение времени инкубации полоски - при исследовании больших серий образцов качество визуальной оценки снижается по мере утомления лаборанта.

Устранение указанных недостатков и, как следствие, большей точности исследования, позволяет достичь использование автоматических и полуавтоматических анализаторов с фотометрической оценкой результатов изменения окраски индикаторных зон тест-полосок. Анализаторы в автоматическом режиме осуществляют фотометрию регистрируя при этом не интенсивность окраски реакционных зон тест-полоски после их взаимодействия с биохимическими компонентами образца, а интенсивность светового потока, отраженного от поверхности каждого тестового элемента. После сканирования система, учитывая коэффициент отражения, превращает оптический сигнал в электрический, производит расчет и распечатку результатов.

Рис. 2 Устройство (а) и принцип работы (б) отражательного фотометра: 1 — источник света; 2 — конденсорные линзы; 3 — фотоприемник; 4 — диафрагмы (по А. В. Никифорову).